2005年，在《有招出招》中表演口技，模仿二胡、青蛙、吸尘机、萧亮、钟景辉等十多种声音而获导演叶念琛邀请演出电影《独家试爱》。

2006年，被调到戏剧组，为郭晋安于剧集《东方之珠》凌风一角作幕后代唱。

2007年，在时装处境剧《同事三分亲》中饰楼华扬名。

2008年TVB台庆晚会中，与阮兆祥、李思捷组成“扮演天王福禄寿”。在电影《保持通话》中扮演手机售货员。

2008年，经无线倾洽加盟英皇娱乐Music Plus为旗下合约歌手，并成为香港小姐竞选的司仪。同年，在时装处境剧《毕打自己人》中饰邓励军，并获得飞跃进步男艺员奖项。

2009年，成为第28届香港电影金像奖的司仪之一，并担任林峰红馆演唱会的嘉宾。同年，为王祖蓝度身打造的喜剧电影《矮仔多情》，成为他第一部作为男一号出演的电影。

2010年，王祖蓝主演了电影《72家租客》和电视剧《情人眼里高一D》。3月27日开始，担任香港TVB扮演综艺《荃加福禄寿》其中一位主持“禄”。7月30日至31日在香港伊丽莎伯体育馆举行一连三场《咪咁扮嘢》王祖蓝演唱会。同年，王祖蓝参与主演的《人间喜剧》和《翡翠明珠》先后在香港和大陆上映。

2012年8月开机的《叶问-终极一战》中饰演盲公陈。11月29日，在《百变大咖秀》扮演葫芦娃。12月7日上映的《我的老公不靠谱》饰演李先生，即是毒舌蓝。12月27日，在《百变大咖秀》扮演哥哥张国荣。

2013年1月17日，在《百变大咖秀》中模仿吉祥三宝，演绎《吉祥三宝》。1月31日，在《百变大咖秀》中模仿龚琳娜的《法海不懂爱》。2月14日，在《百变大咖秀》与女友一起上台演绎，互相表白。2月在《食为奴》饰演高天宝，透过饮食帮助雍正成就大业，与雍正有兄弟之谊。钟情年若碧，后与米小鱼成亲。

2014年，王祖蓝加盟综艺节目《奔跑吧兄弟》并主演了电影版。

2015年，参加综艺节目《奔跑吧兄弟》第二季。

2016年1月，参加东方卫视社交服务爆笑减压节目《四大名助》。在邵氏旗下成立工作室，已在北京成立工作室，已签下妻子李亚男。

2016年2月，由李静主持的《静间隔》，请来了王祖蓝李亚男佳偶做客新年开播第一期。这是伉俪俩人的首次会见，现场出格亲吻秀恩爱，并称当时他们时常在高速公路上约会，更欺压在坟场约会；同年，参加北京卫视明星真人秀《跨界歌王》的比赛，获得总决赛亚军；10月1日，主演的喜剧动作电影《王牌逗王牌》上映；10月17日，参演电视剧《欢喜密探》上线播出。

2018年3月2日，2018年中央电视台元宵晚会，王祖蓝、李亚男演唱歌曲《花好月圆夜》。

2019年1月31日，导演歌舞电影《你咪理，我爱你！》于香港上映。